植物激素乙烯具有多种生物学功能，如促进果实成熟，促进衰老，促进脱落，抑制生长等。乙烯在常温下呈气态，因此非常适合于用气相色谱分析。用气相色谱很容易将乙烯与其它低分子量碳氢化合物分开，并进行定量测定。测定乙烯的气相色谱通常多采用气固色谱，常以Porapak（一种多孔高聚物）或硅胶作固定相，氮气作流动相。检测乙烯用火焰离子检测器（FID），最低检测浓度可达0.01μl/L。

由于乙烯是气体，而且在水中的溶解度很低（常压下25℃时每升水中只能溶解约ul），所以植物组织可将其不断地释放到周围环境当中。因此，测定乙烯时必须首先对其进行富集。

1.仪器设备

气相色谱仪、色谱柱、FID检测器、冰箱、流动采气装置、密气性注射器、恒温水浴、7ml带胶皮盖小瓶、滤纸等。

2.操作方法

1）乙烯气体的富集：富集乙烯气体的方法有多种，如低温冷凝法、高氯酸汞吸收法、密封容器采集法、负压采集法以及直接用密气性注射器从植物组织间隙中抽吸等方法。下面介绍的是一种连续流动采气装置。

（1）采气装置的安装：按图10-2所示安装连续流动采气装置。管①置于冰浴中，管中装有0.25mol/L的高氯酸汞、2mol/L的高氯酸溶液50ml，以除去流入气流中的乙烯；管②和管③中各装有ml的无离子水，以使气流的温度回升至室温；④为样品室，底部垫一层湿润的滤纸；管⑤置冰浴中，以凝结气流中的水蒸气；管⑥为乙烯吸收管，内装20ml高氯酸汞。

（2）采气操作：打开氮气气瓶开关并调节气体流量至2～3L/h。2h后停止通气，取下管⑥，盖紧盖子，置2℃下待气相色谱测定，此为空白。接上另一只乙烯吸收管⑥，并在样品室中放入植物组织3～4g，盖好盖子，打开气瓶开关，并调节流量。通气2h后，取下管⑥待测。

2）气相色谱仪分析乙烯的释放量

（1）色谱条件的选择：色谱柱可采用硅胶柱（～目），柱直径0.4cm，柱长80cm；氮气和氢气流速都为30L/min，空气流速为0.5L/min；柱温℃，进样量4ml。由于每次制备的色谱柱的柱效之间会有差异，所以最佳色谱条件也会有所不同。操作中可先用标准的甲烷、乙烷、丙烷、乙烯、乙炔混合气体来确定最佳色谱条件。

（2）标样乙烯的测定：用氮气将标准乙烯稀释为0.01、0.1、1、10、μl/L，分别取10μl加入装有4ml高氯酸汞的7ml测量小瓶中，用胶皮盖密封瓶口，然后用注射器注入2ml4mol/L的HCl，充分摇匀后置25℃水浴中保温90min。抽取上部气体进样分析。以加入乙烯的微升数为横坐标、色谱峰的峰面积为纵坐标作图。如果色谱峰为对称峰，峰面积按峰高乘以半峰宽计算；如果色谱峰为前伸峰或拖尾峰，峰面积的计算公式为峰高值乘以0.15和0.85峰高处峰宽的平均值。

（3）植物乙烯样品的分析：分别取已经吸收了乙烯的空白管中的高氯酸汞溶液和样品管中的高氯酸汞溶液4ml放入7ml测量小瓶中，并按标样测定方法释放和测定乙烯。量出空白和样品峰的峰面积，然后从标准曲线上查出对应的乙烯量。用样品测定值减去空白测定值即是4ml高氯酸汞溶液中所吸收的乙烯的量（V）。最后按下式求出每小时每克鲜重植物组织中所释放的乙烯的微升数。

每克植物组织每小时释放乙烯的微升数=V÷4×20÷植物鲜重÷2

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